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Southern Blot原理和實(shí)驗(yàn)步驟

SouthernBlot印跡定義：涉及將凝膠上分離的特定DNA、RNA或蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到載體膜上以進(jìn)行檢測(cè)或鑒定的分析技術(shù)稱為印跡。變性片段從凝膠中轉(zhuǎn)移到載體膜上的過(guò)程使其易于使用探針或抗體進(jìn)行分析。根據(jù)要分離的物質(zhì)，印跡技術(shù)可能是——Southern印跡、Northern印跡或Western印跡，它們分別分離DNA、RNA和蛋白質(zhì)。SouthernBlot是一種用于分子生物學(xué)、免疫遺傳學(xué)和其他分子方法的分析技術(shù)，用于從DNA樣品的混合物或DNA鏈中的特定堿基序列中檢測(cè)或鑒定感興...

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實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的儀器和實(shí)驗(yàn)室耗材有哪些？

用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備和實(shí)驗(yàn)室耗材有很多種，進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需的基本設(shè)備如下：設(shè)備有益設(shè)備有用的附加設(shè)備振蕩培養(yǎng)箱生物安全柜低溫冷凍柜顯微鏡細(xì)胞計(jì)數(shù)儀玻璃器皿清洗機(jī)滅菌器真空泵菌落柜臺(tái)清洗儀器二氧化碳培養(yǎng)箱共聚焦顯微鏡殺菌干燥箱制備和質(zhì)量控制熒光激活細(xì)胞分選儀離心機(jī)溫度記錄純水機(jī)細(xì)胞生物反應(yīng)器液氮罐移液器和自動(dòng)移液器水浴鍋動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室所需基本設(shè)備清單：1.無(wú)菌工作區(qū)/細(xì)胞培養(yǎng)罩（即層流罩或生物安全柜）2.培養(yǎng)箱（推薦使用潮濕的二氧化碳培養(yǎng)箱）3.水浴4.離心...

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關(guān)于蛋白電泳中的SDS聚丙烯酰胺凝膠

蛋白電泳是研究蛋白質(zhì)性質(zhì)的一種相對(duì)簡(jiǎn)單、快速和高靈敏度的工具。它是分析化學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)的主要工具。通過(guò)電泳分離蛋白質(zhì)是基于這樣一個(gè)事實(shí)，即帶電分子將在施加電場(chǎng)時(shí)通過(guò)基質(zhì)遷移。蛋白質(zhì)電泳分離的基質(zhì)是聚丙烯酰胺。用于形成聚丙烯酰胺的化學(xué)試劑是單體丙烯酰胺和N，N'-雙丙烯酰胺（雙-丙烯酰胺）。聚合丙烯酰胺和雙丙烯酰的方法是使用TEMED（四*基乙二胺）和過(guò)硫酸銨。聚丙烯酰胺凝膠內(nèi)部的聚合形成了一個(gè)交聯(lián)的微孔網(wǎng)絡(luò)。這種孔隙網(wǎng)絡(luò)允許小蛋白質(zhì)分子快速通過(guò)，同時(shí)減緩較大蛋白質(zhì)的...

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紫外光譜的原理及其應(yīng)用

紫外光譜是紫外分光光度計(jì)等分析化學(xué)中的重要工具。UV（紫外線）光譜的另一個(gè)名稱是電子光譜，因?yàn)樗婕皩㈦娮訌幕鶓B(tài)提升到更高的能量或激發(fā)態(tài)。在本文中，我將解釋紫外光譜的基本原理、工作原理和所有應(yīng)用。一、紫外光譜簡(jiǎn)介紫外光譜是一種吸收光譜，其中紫外線區(qū)域（200-400nm）的光被分子吸收。紫外輻射的吸收導(dǎo)致電子從基態(tài)激發(fā)到更高能態(tài)。被吸收的紫外線輻射的能量等于基態(tài)和高能態(tài)之間的能量差（deltaE=hf）。通常，有利的躍遷是從MAX占據(jù)分子軌道(HOMO)到LOW未占據(jù)分子軌道...

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ISS原位測(cè)序原理和方法應(yīng)用

原位測(cè)序(ISS)是一種新方法，通過(guò)該方法直接在固定組織或細(xì)胞樣品的切片中對(duì)mRNA進(jìn)行測(cè)序。原位測(cè)序原理關(guān)鍵是測(cè)序信息與其位置之間的聯(lián)系—在一些情況下，是亞細(xì)胞位置。這與傳統(tǒng)測(cè)序不同，后者在將樣本從內(nèi)源環(huán)境中移除后分析樣本，從而丟失位置信息。ISS由斯德哥爾摩大學(xué)開(kāi)發(fā)，可同時(shí)量化數(shù)百個(gè)mRNA轉(zhuǎn)錄本，并以單細(xì)胞分辨率在空間上解析它們。該方法使用四種熒光染料來(lái)指示核酸堿基、RNA掛鎖探針和催化在掛鎖探針位置形成環(huán)化DNA的酶，這種機(jī)制稱為滾環(huán)擴(kuò)增。使用成像技術(shù)讀取產(chǎn)生的熒光D...

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