凝膠成像儀相信大家都不陌生,它在生物實(shí)驗(yàn)中都扮演著什么角色呢?今天我們就來(lái)了解一下:
1、 采集實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的圖像
凝膠成像儀的主要作用使通過(guò)自帶的CCD設(shè)備拍攝圖像并傳輸在電腦中。工作原理如下:在暗箱中的紫外燈照射下,通過(guò)紫外燈的光源,在暗箱中自動(dòng)完成對(duì)焦成像并優(yōu)化所獲取的圖像信息存儲(chǔ)在設(shè)備中,實(shí)驗(yàn)者可以在圖像中添加注釋貨相關(guān)信息,編輯完成后,即可打印或傳輸。
2、DNA或蛋白分子定量
通過(guò)凝膠電泳實(shí)驗(yàn)獲得不同的DNA或蛋白條帶影像,再利用凝膠成像儀上的圖象處理軟件中相關(guān)功能自動(dòng)比對(duì)Marker標(biāo)準(zhǔn)條值,來(lái)判別未知條帶的分子量。
3、密度定量
在DNA分子實(shí)驗(yàn)中常常會(huì)用紫外吸收法來(lái)測(cè)定DNA/RNA的濃度, 但此方法只能測(cè)定總樣品中核苷酸的濃度,而單個(gè)基因片段上的核苷酸濃度卻無(wú)法測(cè)試。 而利用凝膠成像儀的圖象處理軟件,可對(duì)單片段進(jìn)行密度標(biāo)定后 ,根據(jù)單位條帶上的光密度值得到其DNA含量。此方法同樣適用于蛋白實(shí)驗(yàn)。
4、密度掃描
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,需要經(jīng)常計(jì)算蛋白表達(dá)產(chǎn)物占全菌體蛋白的百分比。傳統(tǒng)的操作方法較為繁瑣,若利用固定波段的白光凝膠成像儀則可輕松完成密度掃描與計(jì)算。
5、PCR定量
凝膠成像儀不僅可以進(jìn)行密度測(cè)量、分子量測(cè)定、圖像采集,還可用于PCR定量。我們?cè)谧鯬CR實(shí)驗(yàn)時(shí)有時(shí)會(huì)擴(kuò)增出多種不同的條帶,利用PCR定量指令可以自動(dòng)計(jì)算單條帶占總條帶書(shū)的百分比,類(lèi)似于密度測(cè)定功能。
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